Cours: La Chromatograpphie

Définitions:
La chromatographie est une méthode physique de séparation basée sur les différences
d'affinités des substances à analyser à l'égard de deux phases, l'une stationnaire ou fixe,
l'autre mobile. Selon la technique chromatographique mise en jeu, la séparation des
composants entraînés par la phase mobile, résulte soit de leur adsorption et de leur
désorption successives sur la phase stationnaire, soit de leur solubilité différente dans
chaque phase.
On définit un coefficient de partition K:
K =
masse de soluté dans la phase stationnaire par unité de volume
masse de soluté dans la phase mobile par unité de volume
On peut classer les méthodes chromatographiques d'après la nature des phases utilisées
ou celle des phénomènes mis en oeuvre dans la séparation.
Nature des phases:
Phase fixe:
La phase fixe peut être solide ou liquide. Les solides, silice ou alumine traitées,
permettent la séparation des composants des mélanges grâce à leurs propriétés
adsorbantes. Ils peuvent être employés comme remplissage d'une colonne
(chromatographie par gravité et chromatographie à haute performance ou HPLC) ou
étalés en couche mince sur une plaque de verre, d'aluminium ou sur une feuille de
matière plastique (chromatographie sur couche mince ou CCM)
La phase fixe peut aussi être constituée par un liquide imprégnant un support solide ou
encore par une chaîne carbonée fixée sur un support (phase greffée). ainsi en
chromatographie sur papier, la phase fixe est formée par l'eau que les molécules de
cellulose du papier adsorbent, alors qu'en chromatographie en phase gazeuse, elle est
constituée d'un liquide peu volatil et thermiquement stable imprégnant un granulé
poreux.
Phase mobile:
La phase mobile est:
• soit un gaz (ex: chromatographie en phase gazeuse): la phase mobile est appelée gaz
vecteur ou gaz porteur.
• soit un liquide (ex: chromatographie sur papier, couche mince ou colonne): la phase
mobile est appelée éluant.
Nature des phénomènes:
On distingue quatre types de phénomènes que nous allons étudier successivement:
• chromatographie d'adsorption
• chromatographie de partage
• chromatographie ionique
• chromatographie d'exclusion