TECHNIQUES D'ENSEMENCEMENT

by **kenza** Sat 14 Aug - 21:01

TECHNIQUES D'ENSEMENCEMENT

L’ensemencement consiste à déposer dans un milieu neuf des germes prélevés dans un milieu de culture mère. Le transport est en général effectué avec une anse ou une pipette Pasteur.
1 / Ensemencement avec une anse:

- prendre les précautions nécessaires pour travailler dans de bonnes conditions d’aseptie

( nettoyage paillasse, mains ... )

- veiller à travailler dans la zone stérile autour du bec Bunsen
- tenir le tube contenant la culture mère dans la main gauche, déboucher près de la flamme et garder le coton dans la main.
- flamber l’ouverture du tube.
- stériliser l’anse en la portant au rouge dans la flamme du bec Bunsen, la laisser refroidir dans la zone stérile.
- prélever et repiquer rapidement dans le tube contenant le milieu de repiquage :

. repiquage dans un milieu liquide : repiquer ce qui est prélevé à l’intérieur de la boucle
. repiquage sur milieu solide : repiquer en déplaçant en zig zag l’aiguille sur la surface de l’agar, du fond du tube vers l’ouverture, en prenant soin de ne pas érafler la gélose

- repasser dans la flamme l’aiguille à ensemencer en la portant au rouge. L’aiguille est prête pour un nouvel ensemencement .
- flamber l’ouverture des tubes, flamber légèrement les cotons, boucher.

2 / Technique d'ensemencement avec la pipette Pasteur :
Les manipulations se différencient des précédentes par quelques détails :

- la pipette est passée rapidement dans la flamme.

- l'effilure est cassée à la pince dans la zone stérile.
- on aspire les bouillons de culture ( éviter que le bouillon de culture souille le coton, danger d'infection pour le manipulateur, pas plus que la salive du manipulateur, danger d'infection pour la culture )
- on souffle pour ensemencer dans le tube stérile.
- la pipette ne sert qu'une fois.

by **ilyeshh** Sat 4 Sep - 5:24

c'est très intéressant......merci bien

by **Rima Br** Sun 5 Sep - 19:41

Merci Kenza
si tu veux, tu peux ouvrir un autre sujet lié à celui-là pour nous présenter les différents milieux utilisés pour l'ensemencement.

by **kenza** Tue 7 Sep - 1:55

Rima Br wrote:Merci Kenza
si tu veux, tu peux ouvrir un autre sujet lié à celui-là pour nous présenter les différents milieux utilisés pour l'ensemencement.

oui rima je vais essayé de le poster demain incha allah

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