Cours: La chromatographie d'exclusion

La phase stationnaire est généralement un polymère poreux dont les pores ont des
dimensions choisies en rapport avec la taille des espèces à séparer. On réalise une sorte
de tamis à l'échelle moléculaire, dit à perméation sélective. Le coefficient de partition
s'appelle dans ce cas le coefficient de diffusion. Cette technique est encore appelée
filtration sur gel ou perméation de gel selon la nature de la phase mobile (aqueuse ou
organique).
Le diamètre des pores est une caractéristique de chaque type de gel.
Un mélange de solutés de masses molaires variables traverse une épaisseur donnée de
gel: les grosses molécules, celles dont le diamètre est supérieur à celui des pores, sont
exclues et éluées les premières; les petites et moyennes molécules sont éluées plus
tardivement, car incluses, leur migration est freinée en diffusant dans le gel.
La séparation est donc réalisée par le fait que les solutés sont élués dans l'ordre inverse
des masses molaires.